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如何正確處理ELISA試劑盒的檢測樣本?

發(fā)布時間: 2022-08-25  點擊次數(shù): 1035次
  ELISA試劑盒吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體,適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型。其中,血清是常見的檢測標本之一,ELISA試劑盒血清標本的保存建議有以下幾點:
 
  1.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
 
  2.血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,ELISA如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
 
  3.冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
 
  4.要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
 
  5.標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。

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